實(shí)驗(yàn)關(guān)于脫細(xì)胞基質(zhì)研究中那個(gè)最“磨人"的環(huán)節(jié)——樣品制備，不知道你們有沒(méi)有過(guò)這樣的經(jīng)歷：面對(duì)一塊珍貴的脫細(xì)胞組織，想把它變成精細(xì)、均一的粉末或勻漿，卻發(fā)現(xiàn)它要么堅(jiān)韌不拔磨不動(dòng)，一使勁升溫又把寶貴的生物活性成分給毀了。真的是很令人頭疼。但是，最近實(shí)驗(yàn)室里新裝備的一臺(tái)浸入式液氮冷凍研磨儀，改變了我的工作節(jié)奏和心態(tài)，它居然就那么輕松簡(jiǎn)單地解決了我的實(shí)驗(yàn)困擾！??！

　　“低溫"魔法：破解熱損傷的死循環(huán)

　　首先得說(shuō)說(shuō)這“浸入式液氮"的核心優(yōu)勢(shì)。我們做脫細(xì)胞基質(zhì)研究，無(wú)論是后續(xù)做3D打印生物墨水、制備微載體，還是做生化分析，第一步就是要得到結(jié)構(gòu)完整、成分活性的基質(zhì)材料。

　　傳統(tǒng)方法，無(wú)論是手動(dòng)研磨還是某些常溫設(shè)備，都會(huì)出現(xiàn)摩擦生熱的現(xiàn)象。熱量一上來(lái)，蛋白質(zhì)就容易變性，那些我們千方百計(jì)想保留的生長(zhǎng)因子、糖胺聚糖等活性成分，效能就可能大打折扣。更別提如果研磨時(shí)間拖長(zhǎng)，樣品還可能降解，之前的脫細(xì)胞努力就都全白費(fèi)了。

　　而上海凈信的浸入式液氮冷凍研磨儀，玩的是“物理外掛"。它直接把裝有樣品的研磨罐浸入-196°C的液氮中，讓組織在幾秒鐘內(nèi)達(dá)到玻璃化脆性狀態(tài)。這個(gè)時(shí)候，組織變得像玻璃一樣脆，但內(nèi)部的微觀結(jié)構(gòu)卻被“凍齡"保存。接下來(lái)，儀器施加的機(jī)械沖擊力，作用在這樣一個(gè)“脆骨頭"上，效果是粉碎性的高效，卻又因?yàn)榈蜏丨h(huán)境，是“冷靜"的無(wú)熱損傷。這簡(jiǎn)直是為熱敏感的生物材料量身定做的方案。

　　從“大塊頭"到“細(xì)粉末"：均質(zhì)化帶來(lái)的無(wú)限可能

　　那么，把組織凍脆了然后磨碎，具體能帶來(lái)什么好處呢？那真是打開(kāi)了新世界的大門。

　　那當(dāng)然是獲得超細(xì)的ECM粉末。像《JoVE實(shí)驗(yàn)視頻期刊》上刊登的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)方案里描述的，他們就是將凍干的脫細(xì)胞組織，通過(guò)液氮預(yù)冷后在球磨儀中以高頻進(jìn)行多次循環(huán)研磨，最終得到精細(xì)的細(xì)胞外基質(zhì)粉末。這種粉末的比表面積巨大，溶解或再水合效率較高，是制備均質(zhì)生物墨水、合成微載體或靜電紡絲的起點(diǎn)。想想看，當(dāng)你擁有如此均一的原料，后續(xù)構(gòu)建的支架，其力學(xué)性能和細(xì)胞相容性的可重復(fù)性是不是會(huì)大大提升？

　　第二，是實(shí)現(xiàn)高效的細(xì)胞級(jí)勻漿。對(duì)于需要從新鮮或冷凍組織中直接獲取單細(xì)胞懸液的應(yīng)用，這一點(diǎn)至關(guān)重要。組織研磨儀的工作原理就是通過(guò)精密的機(jī)械剪切力在低溫下分離組織，能在幾分鐘內(nèi)獲得有活性的單細(xì)胞。雖然它不一定是浸入式液氮，但原理相通：低溫保護(hù)活性，機(jī)械力實(shí)現(xiàn)解離。這為我們脫細(xì)胞后，進(jìn)一步分析基質(zhì)中殘留的細(xì)胞成分、或者研究細(xì)胞-基質(zhì)相互作用，提供了高質(zhì)量的前處理樣本。

　　 不止于“磨"：它如何重塑實(shí)驗(yàn)邏輯

　　用了這臺(tái)浸入式液氮冷凍研磨儀儀器一段時(shí)間后，我發(fā)現(xiàn)自己整個(gè)實(shí)驗(yàn)的思維方式都在改變。

　　首先，是“保真度"的飛躍。 我之前一直擔(dān)心研磨過(guò)程會(huì)破壞脫細(xì)胞基質(zhì)中精細(xì)的三維膠原網(wǎng)絡(luò)和信號(hào)分子。但低溫杜絕了熱源干擾，讓我對(duì)下游的蛋白質(zhì)組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析數(shù)據(jù)更有信心。我知道我測(cè)出來(lái)的，更接近樣本本來(lái)的樣子。

　　其次，是效率與可擴(kuò)展性的平衡。 沒(méi)錯(cuò)，一次處理一個(gè)樣品，看起來(lái)不如一些高通量研磨儀。但是，對(duì)于脫細(xì)胞基質(zhì)這種常需要個(gè)性化處理、每個(gè)樣本都珍貴的研究而言，這種“一對(duì)一"的深度、可控處理，反而是另一種高效。它保證了每個(gè)樣品都能在適合的條件下被處理。而且，這種方法是可標(biāo)準(zhǔn)化的，一旦建立穩(wěn)定程序，不同批次樣品間的差異會(huì)變小，實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果更可靠，以實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定、高質(zhì)量的核酸提取。

　　最后，是安全與潔凈度的提升。全封閉的研磨罐設(shè)計(jì)，樣品全程在密閉環(huán)境中與液氮接觸、被粉碎，這較大程度地地防止了樣品間的交叉污染，也保護(hù)了實(shí)驗(yàn)人員，避免了氣溶膠或樣品飛濺的風(fēng)險(xiǎn)。在講究生物安全的今天，這點(diǎn)太重要了。

　　所以，繞回我們最初的主題——“精準(zhǔn)制勝"。在我看來(lái)，浸入式液氮冷凍研磨儀的“精準(zhǔn)"，不僅僅體現(xiàn)在它能準(zhǔn)確設(shè)定研磨時(shí)間和頻率。更在于它精準(zhǔn)地?fù)糁辛嗣摷?xì)胞基質(zhì)制備中對(duì)“低溫"和“物理性破壞"的雙重核心需求，在“保持活性"和“實(shí)現(xiàn)均質(zhì)"之間找到了那個(gè)黃金平衡點(diǎn)。

　　它可能不是實(shí)驗(yàn)室里最轟轟烈烈的設(shè)備，但卻像一個(gè)沉穩(wěn)的伙伴，在實(shí)驗(yàn)最起始、最基礎(chǔ)也是最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，為我們守住了數(shù)據(jù)的真實(shí)性和材料的生物活性。如果說(shuō)脫細(xì)胞基質(zhì)是組織再生的“土壤"，那么這臺(tái)儀器就是幫助我們將這塊土壤精細(xì)耕耘、使其更富“肥力"的農(nóng)具。

　　如果你的實(shí)驗(yàn)研究也正卡在樣品前處理的瓶頸上，不妨也關(guān)注一下這款上海凈信的浸入式液氮冷凍研磨儀，它一定會(huì)給你帶來(lái)意想不到的實(shí)驗(yàn)效果！